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Biomek+Echo: 高通量、低成本NGS建庫的秘訣
在過(guò)去十多年里,隨著(zhù)二代測序技術(shù)的發(fā)展,測序成本已經(jīng)下降了幾個(gè)數量級,但是二代測序樣品文庫制備成本仍然高昂,過(guò)程依舊復雜。微生物及病毒全基因組測序能幫助科學(xué)家們確認基因組編輯正確性,解析病原的變異及進(jìn)化,是高通量基因編輯和調查微生物組、病毒學(xué)研究的常規工作。液體處理專(zhuān)家貝克曼庫爾特創(chuàng )新推出Biomek i5+Echo 525超高通量自動(dòng)化整合系統,幫助您實(shí)現二代測序文庫構建中的高通量和低成本的需求。
圖1. Biomek i5 +Echo 525整合系統。通過(guò)將Echo 525快速、精|確的聲波移液技術(shù)與Biomek i系列工作站強大而靈活的功能相結合,可以將文庫制備工作提高到超高通量。
我們使用illumina Nextera XT DNA試劑盒,以3種不同的微生物樣品類(lèi)型(蠟狀芽孢桿菌,大腸埃希氏菌,紅球菌)進(jìn)行實(shí)驗,測試了該微量化方法的有效性。Biomek i5+Echo 525 整合系統的微量化文庫制備方案可將反應體系縮小20倍,降低每次反應的試劑成本;可單次處理384個(gè)樣品,提高樣品處理通量。 值得注意的是,根據Illumina的標準推薦實(shí)驗流程,手工操作8個(gè)樣品的時(shí)間約為3小時(shí)。利用Biomek i5 +Echo 525整合系統,完成384個(gè)樣品的文庫制備僅需4小時(shí),該時(shí)間包括了試劑分裝和孵育。試劑分裝利用選擇性吸頭移液功能,可處理靈活多變的樣品數量。微量化文庫制備使更高的通量成為可能,而無(wú)需大幅增加時(shí)間。
圖2. 微量化Illumina Nextera XT文庫制備的自動(dòng)化流程。灰色代表Biomek i5完成步驟,藍色代表Echo 525完成步驟,紅色代表手工干預步驟。Echo用于反應體系構建及Normalization/pooling;Biomek配置384通道加樣器,并具有選擇性吸頭移液功能,用于分裝Echo所需試劑并進(jìn)行產(chǎn)物純化;可選配臺面整合的PCR儀,用于PCR擴增和孵育,減少人為干預。
圖3.向導式的軟件操作界面(左),和臺面自動(dòng)校對功能 (右)。如左圖所示,在軟件操作界面上用戶(hù)可以選擇樣本數量,是否使用臺面整合的PCR儀,以及運行工作流程的哪個(gè)部分。具備臺面自動(dòng)校對功能(右圖),當操作人員完成耗材擺放后,工作站可自動(dòng)判定耗材擺放是否正確,對錯誤擺放位置進(jìn)行提示,確保程序運行前臺面擺放正確。避免由于人為擺放耗材錯誤,導致設備碰撞或試劑、時(shí)間損失。
Better together—— Echo + Biomek自動(dòng)化NGS建庫方案:
文庫構建體系縮小20倍相應降低了試劑成本,無(wú)需吸頭的納升級聲波介導移液節省了耗材成本。
單次384個(gè)樣品的處理,在單位時(shí)間內實(shí)現了超高通量的樣本處理。
精|準的納升級至微升級移液技術(shù)及自動(dòng)化處理,是獲得真實(shí)結果的保障。
向導式軟件操作界面和臺面自動(dòng)校對功能可減少人為操作失誤。
強大的數據追蹤系統能實(shí)現樣本溯源及追蹤,保證數據對接準確性。
還等什么,快來(lái)向我們索取相關(guān)資料,更新你的實(shí)驗裝備吧!