DO MORE with LESS | 用聲波玩轉單細胞測序

單細胞測序技術(shù)起始核酸材料極少，步驟比普通NGS繁雜，實(shí)驗周期更長(cháng)，難度和風(fēng)險也更大。重現性和成功率是一大考驗。單細胞測序方法眾多，除了商品化試劑盒，許多研究人員也會(huì )針對自己關(guān)注的特征開(kāi)發(fā)全新的技術(shù)。另一方面，開(kāi)展腫瘤異質(zhì)性等針對細胞群體的研究越來(lái)越普遍，這需要對大批量細胞進(jìn)行逐一的測序和解析。如果按照試劑盒常量/rxn，手工完成每一個(gè)細胞的實(shí)驗，勞力和成本都難以承受。

Echo硬核的聲波移液技術(shù)技術(shù)，通過(guò)能量控制準確的納升級液體轉移，噴射液滴單位可以低至2.5 nL。其非物理接觸、準確小量移液、高速度的特征，決定了Echo非常適合解決單細胞測序中遇到的超高通量、技術(shù)靈活多變、反應scale-down成本控制、交叉污染等問(wèn)題。

非物理接觸

     ·  樣本完整性

     ·  無(wú)吸頭消耗

     ·  降低交叉污染風(fēng)險

移液的靈活性

     ·  2.5 /25 nL 每滴

     ·  200-500 滴/秒

     ·  任意孔至任意孔移液

移液條件溫和

     ·  DNA/RNA/蛋白等生物大分子

以結合SMART-Seq cDNA文庫制備及Nextera XT 測序文庫制備的單細胞RNA-seq實(shí)驗為例。SMART-Seq反應體系（50 uL）可以由Echo縮小4，5，8，10，16，20至32倍，Nextera XT 試劑盒可縮小10倍（50 uL至5 ul）使用。值得注意的是，SMART-seq cDNA文庫制備中，常量反應總體積為50 ul, 縮小32倍后反應總體積僅僅只有1.75 uL，還不及一個(gè)常量反應中逆轉錄酶使用量大。借助Echo，一個(gè)96 rxn的試劑盒將具備完成3072 rxn的可能。

Echo可以完成

● 微量化的單細胞基因組放大3

● 微量化的單細胞測序文庫制備

● 微量化的文庫濃度質(zhì)控

● 一步法文庫Normalization&Pooling

● Better together—— Echo plus Biomek自動(dòng)化單細胞測序方案

基于Echo的單細胞文庫制備不受待測細胞數目的限制，支持各種試

Better together—— Echo plus Biomek自動(dòng)化單細胞測序方案

基于Echo的單細胞文庫制備不受待測細胞數目的限制，支持各種試劑盒的靈活組合和NGS建庫方法學(xué)DIY。做你想做的，測你想測的，提供scale-down的微量化反應體系和scale-up的自由度。

將Echo聲波移液工作站與Biomek i-系列自動(dòng)化工作站結合，可實(shí)現更高自動(dòng)化程度的單細胞測序實(shí)驗。Echo完成文庫制備中涉及的微量化反應體系構建， 由Biomek自動(dòng)化工作站配合實(shí)現文庫 Agencourt SPRIselect磁珠PCR clean-up和片段篩選。實(shí)驗流中產(chǎn)生的數據均可查可溯，保證文庫信息安全可靠。

參考：

        1. US Patent 6938987

        2. US Patent 6938995