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揭秘中國人群腎癌關(guān)鍵致病基因:復旦交大團隊發(fā)文《自然·通訊》
如多數腫瘤一樣,腎癌的分子分型是提高腎癌療效及腎癌精準治療的關(guān)鍵。
美國臨床腫瘤蛋白質(zhì)組學(xué)會(huì )(Clinical Proteomic Tumor Analysis Consortium, CPTAC)曾公布了103例透明細胞腎癌患者的蛋白質(zhì)基因組學(xué)特征,為歐美國家的腎癌精準治療提供了依據。但該數據來(lái)源于西方腎癌患者,同國內的患者存在差距,該研究并不能滿(mǎn)足國內腎癌臨床和基礎研究中的迫切需求。
復旦大學(xué)丁琛教授團隊、葉定偉教授團隊和上海交通大學(xué)趙健元教授團隊聯(lián)合對232例本土腎癌患者人群的腎透明細胞癌(Clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)進(jìn)行了分析 ,綜合蛋白組、基因組并結合患者臨床病理特征和生存數據,描繪了中國透明細胞腎癌的蛋白質(zhì)基因表達圖譜,揭示了中國人群腎癌關(guān)鍵致病基因變異。為更優(yōu)的診療提供了依據。該工作發(fā)表于《自然·通訊》1。
下圖描述了該研究的整體思路和方法。
Fig. 1a: Schematic representation of the multiomics analyses of ccRCC, including sample preparation, protein identification, WES, and function verification.
其中WES(全外顯子組測序)是關(guān)鍵數據之一。
作者在文中特別提到,該工作分別使用了IDT埃德特公司的DNA建庫試劑盒(原Swift Biosciences*)、接頭、外顯子WES panel以及定制探針,并使用到了貝克曼庫爾特的SPRIselect (Beckman, B23319)進(jìn)行了文庫的純化。
* 2021年3月,IDT埃德特完成對于Swift Biosciences公司的收購。
IDT埃德特公司的相關(guān)產(chǎn)品:
1. IDT xGen cfDNA & FFPE DNA 建庫試劑盒
使用該試劑盒可對cfDNA樣本或FFPE組織提取的 DNA 樣本進(jìn)行靈敏、準確的變異檢測。使用該試劑盒的專(zhuān)用連接法,可使轉化率達到最高并抑制接頭二聚體形成。在單鏈連接期間引入特異性分子標簽 (UMI) 序列,便于采用多種去重和糾錯法。
2. 原Swift Accel-NGS 2S Hyb DNA 建庫試劑盒(現IDT 2S Hyb DNA 建庫試劑盒)
利用*的技術(shù),保證樣品高效的文庫轉化率,使得降解樣品和低起始量等困難樣品(例如FFPE、cfDNA等樣品)產(chǎn)出高質(zhì)量的測序數據。只需≥10 ng cfDNA 或≥ 100 ng gDNA即可進(jìn)行PCR-free建庫流程。*的5’ 和3’ 修復步驟,針對損傷樣品(如物理打斷后產(chǎn)生損失)進(jìn)行修復;對于富含AT/GC的基因組區域覆蓋度均一,適用于多種樣品類(lèi)型;優(yōu)異、高效的文庫轉化效率使得更多分子進(jìn)行轉化,保持更高的文庫復雜度;無(wú)需接頭稀釋?zhuān)煌鹗剂恳部杀3址€定的文庫轉化效率。
3. IDT全外顯子捕獲試劑盒(xGen Exome Research Panel)
IDT全外顯子捕獲試劑盒(xGen Exome Research Panel)v2由 415,115 條單獨合成且經(jīng)過(guò)質(zhì)控檢驗的 xGen Lockdown 探針組成。探針組跨越人基因組的 34 Mb 目標區域(19,433 個(gè)基因),并且覆蓋 39 Mb 的探針空間(即由探針覆蓋的基因組區域)。探針組中的所有探針均嚴格按照 ISO 13485 標準進(jìn)行生產(chǎn)。探針使用全新的“捕獲感知”(capture-aware) 算法進(jìn)行設計,并進(jìn)行了專(zhuān)有的脫靶分析,確保實(shí)現最完整的設計覆蓋度。每條探針均經(jīng)過(guò)質(zhì)譜法和雙定量測量檢驗,確保探針的質(zhì)量及在探針庫中具有適當的代表性。通過(guò)始終如一的深度覆蓋,致力于推動(dòng)臨床科學(xué)研究。
關(guān)于貝克曼庫爾特的SPRselect:
SPRI純化技術(shù)采用順磁性磁珠、選擇性的結合特定大小的核酸,已廣泛應用于NGS的純化及片段篩選等領(lǐng)域,被超200多主流NGS試劑盒推薦,超15,000篇論文引用。相比于傳統純化磁珠,SPRIselect更具備如下優(yōu)勢:
1,室溫儲存。
即拿即用、省錢(qián)省時(shí):節省昂貴的冰箱空間,更省去大量溫度平衡的時(shí)間;
2,精準的片段篩選,且保證不同批次間穩定性。
不論今年或明年,可靠的SPRIselect將始終如一的產(chǎn)出可重復的片篩結果,無(wú)需重復測試磁珠比例。如下圖所示,不同批次間片篩均值差異不超過(guò)2 bp。提供片段篩選濃度指引。
3,專(zhuān)家選擇
已有超40個(gè)建庫試劑盒推薦SPRIselect;超1,000篇論文選用SPRIselect。
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參考文獻:
1,Qu, Y., Feng, J., Wu, X, et. al. A proteogenomic analysis of clear cell renal cell carcinoma in a Chinese population. Nature Communications. (2022). DOI: 10.1038/s41467-022-29577-x